Ia tidak lama dahulu bahawa kejuruteraan genetik adalah bahan fiksyen sains - menjadikan satu organisma tumbuh dengan ciri-ciri yang lain. Sejak tahun 1970-an, teknik manipulasi genetik telah maju ke titik di mana splicing DNA asing ke dalam organisma hampir rutin. Sebagai contoh, gen untuk perosak hama boleh disambungkan ke jagung, gen untuk membuat insulin manusia boleh dimasukkan ke dalam bakteria dan gen untuk meniru kanser manusia boleh dimasukkan ke dalam tikus makmal. Butiran prosedur terlalu rumit untuk menerangkan dalam artikel pendek, dengan banyak pilihan pada setiap langkah, tetapi garis besar konseptual dari urutan langkah-langkah logik adalah cukup jelas.
Inkubasi DNA plasmid dan DNA yang menarik dengan enzim sekatan. Enzim sekatan akan mengesan urutan DNA asas tertentu dan memotong DNA pada ketika itu. Enzim sekatan diperoleh daripada beberapa mekanisme pertahanan bakteria terhadap virus. Mereka adalah molekul yang akan menyerang DNA di mana mereka mengesan corak pangkalan yang diberikan.
Inkubasi plasmid cut-apart dan fragmen DNA genomik dengan ligase DNA. Dengan kebanyakan enzim sekatan, plasmid pekeliling dan serpihan DNA genomik akan mempunyai "pelekat yang melekat" yang saling melengkapi. Ligase DNA kemudiannya akan selesai merekatkan kepingan bersama. Hasilnya adalah sekumpulan plasmid pekeliling yang merangkumi bahagian DNA genomik.
Masukkan plasmids ke dalam bakteria dan kultur bakteria untuk menanam koloni organisma yang dibubarkan dengan DNA diubahsuai. Jika plasmid anda mempunyai gen tahan antibiotik yang tidak mempunyai bakteria tuan rumah, anda boleh secara automatik menyiasat bakteria yang telah diubah suai secara berkesan dengan membiak bakteria pada medium pertumbuhan yang ditanam antibiotik. Terdapat beberapa kaedah untuk memasukkan plasmid ke dalam bakteria, seperti menggunakan microneedle, menggunakan medan elektrik untuk membuka lubang-lubang kecil dalam membran bakteria, atau hanya meletakkan bakteria dan plasmid bersama-sama dalam penyelesaian yang sama dan membiarkan bakteria menyerapnya secara semulajadi.
Sel sampel dari koloni berbeza bakteria yang diubah suai. Basuh sel sampel dengan penyelesaian detergen untuk memecahkan membran bakteria dan ekstrak DNA, kemudian panaskannya atau dedahkan kepada natrium hidroksida untuk memisahkan helai. Ini mendedahkan urutan asas DNA untuk dianalisis.
Inkubasi DNA dengan probe pendarfluor. Bersinar cahaya ultraviolet pada DNA terinkubasi dan perhatikan pendarfluor. Siasatan terdiri daripada sekuens DNA pendek yang sepadan dengan DNA genom yang anda masukkan. Di mana penyelidikan menyesuaikan dengan DNA yang anda cari, ia akan bersinar apabila diterangi.
Mengasingkan bakteria dari koloni yang mengandungi gen yang anda ingin masukkan. Duplikat DNA anda dengan sama ada membiarkan koloni bakteria tumbuh, atau ekstrak DNA seperti yang anda lakukan sebelum ini dan duplikatnya dalam mesin tindak balas rantai polimerase.