Kandungan
Ahli kimia sering menggunakan instrumen yang dikenali sebagai spektrometer ultraviolet-kelihatan atau UV-Vis untuk mengukur jumlah ultraviolet dan radiasi yang dapat dilihat yang diserap oleh sebatian. Jumlah ultraviolet atau radiasi yang dapat dilihat diserap oleh sebatian bergantung kepada tiga faktor: kepekatan, c, sampel; panjang laluan, l, pemegang sampel, yang menentukan jarak di mana sampel dan radiasi berinteraksi; dan pekali penyerapan molar, e, kadang-kadang disebut sebagai koefisien kepupusan molar. Persamaan tersebut dinyatakan sebagai A = ecl dan dikenali sebagai hukum Beer. Persamaan itu mengandungi empat pembolehubah, dan untuk menentukan mana-mana empat memerlukan nilai yang diketahui selama tiga.
Pengiraan
Tentukan penyerapan untuk sebatian pada panjang gelombang yang dikehendaki. Maklumat ini boleh diekstrak daripada spektrum penyerap yang dihasilkan oleh mana-mana instrumen UV-Vis standard. Spektrum biasanya dianggap sebagai penyerap berbanding panjang gelombang nanometer. Pada umumnya, kemunculan mana-mana "puncak" dalam spektrum menunjukkan panjang gelombang minat.
Hitunglah kepekatan sampel dalam mol per liter, mol / L, juga dikenali sebagai molarity, M. Persamaan umum untuk molarity ialah
M = (gram sampel) / (berat molekul kompaun) / liter larutan.
Sebagai contoh, sampel yang mengandungi 0.10 gram tetraphenylcyclopentadienone, dengan berat molekul 384 gram setiap mol, dibubarkan dan dicairkan dalam metanol kepada jumlah akhir 1.00 liter akan mempamerkan molarity:
M = (0.10 g) / (384 g / mol) / (1.00 L) = 0.00026 mol / L.
Tentukan panjang laluan melalui pemegang sampel. Dalam kebanyakan kes, ini adalah 1.0 cm. Panjang jalur lain adalah mungkin, terutamanya ketika berurusan dengan pemegang sampel yang dimaksudkan untuk sampel gas. Banyak spektroskopis termasuk panjang laluan dengan maklumat sampel ed pada spektrum penyerap.
Kirakan pekali penyerapan molar mengikut persamaan A = ecl, di mana A adalah penyerapan, c adalah kepekatan dalam mol per liter dan l ialah panjang laluan dalam sentimeter. Selesai untuk e, persamaan ini menjadi e = A / (cl). Meneruskan contoh dari Langkah 2, tetraphenylcyclopentadienone mempamerkan dua maksima dalam spektrum penyerapnya: 343 nm dan 512 nm. Jika panjang laluan adalah 1.0 cm dan penyerapan pada 343 ialah 0.89, maka
e (343) = A / (cl) = 0.89 / (0.00026 * 1.0) = 3423
Dan bagi penyerapan 0.35 pada 512 nm,
e (512) = 0.35 / (0.00026 * 1.0) = 1346.