Kandungan
- Visualisasi yang lebih baik
- Pengenalpastian dan Klasifikasi
- Pengesanan Daya Saing
- Pengenalpastian Struktur Selular
Mikrobiologi mempelajari ciri-ciri mikroorganisma seperti alga, protozoa, bakteria, kulat dan virus menggunakan mikroskop. Walaupun sesetengah organisma seperti sel protozoa dan ragi mudah dipatuhi menggunakan gunung basah, sel-sel bakteria memerlukan pewarnaan. Para saintis mengembangkan beberapa kaedah seperti pewarnaan Gram, pewarnaan asid cepat dan pewarnaan pendarfluor untuk visualisasi lebih baik sel bakteria dan struktur selular. Menggunakan kaedah pewarnaan sedemikian, adalah mungkin untuk mengenal pasti ciri-ciri struktur yang membantu mengklasifikasikan bakteria.
Visualisasi yang lebih baik
Organisma bakteria begitu kecil sehingga kebanyakannya hanya dapat dilihat di bawah mikroskop dengan daya pembesaran 1000X. Walaubagaimanapun saiz pembesaran tidak memberikan tahap kejelasan yang mencukupi, oleh itu bakteria mesti diwarnakan sebelum pemerhatian untuk memberikan kejelasan yang diperlukan untuk visualisasi.
Pengenalpastian dan Klasifikasi
Menghidu bakteria untuk membezakan antara jenis bakteria dikenali sebagai pewarnaan perbezaan. Noda Gram adalah salah satu noda pembeza yang membezakan antara bakteria berdasarkan kandungan dinding sel mereka. Dalam kaedah ini, sel-sel bakteria bertindak balas dengan noda kristal ungu untuk mengambil warna ungu. Apabila menambah ejen de-pewarnaan, sesetengah sel bakteria kehilangan warna sementara yang lain tidak. Pada penambahan safranin noda, sel-sel yang disulihkan mengambil noda untuk kelihatan merah manakala sel-sel bakteria yang tidak kehilangan warna kekal violet. Sel bakteria yang mengambil warna merah dipanggil organisma negatif Gram dan mereka yang tidak mengambil warna diklasifikasikan sebagai organisma positif Gram. Pewarnaan Gram menyediakan kaedah pesat untuk pengenalan awal bakteria yang terlibat dalam jangkitan. Begitu juga, prosedur pewarnaan asid cepat membantu secara khusus mengenal pasti organisma kepunyaan kelas bakteria yang dipanggil Mycobacteria, seperti Mycobacterium tuberculosis.
Pengesanan Daya Saing
Dalam spesimen budaya bakteria, selalunya penting untuk mengesan kehadiran sel-sel bakteria yang hidup. Kaedah pemfailan seperti bantuan pewarnaan pendarfluor untuk mengenal pasti jika sel-sel budaya adalah berdaya maju atau tidak. Bakteria hidup mempunyai keupayaan untuk menukar noda 5-Cyano-2,3-ditolyl Tetrazolium Chloride (CTC) menjadi pewarna yang menunjukkan pendarfluor merah. Oleh itu, apabila budaya yang ternoda dengan CTC memancarkan pendarfluor tersebut, ia menunjukkan kehadiran bakteria yang berdaya maju. Propidium iodide adalah noda yang bertindak hanya pada sel tidak hidup yang mempunyai membran yang rosak, dan oleh itu, berguna dalam mengenal pasti sel-sel bakteria yang mati.
Pengenalpastian Struktur Selular
Pewarnaan menyediakan kaedah yang jelas menggambarkan beberapa struktur selular. Sebagai contoh, kaedah pewarnaan Fuelgen membolehkan pengenalpastian nukleus dalam sel bakterial manakala noda Albert berguna dalam menggambarkan butiran metachromatik. Begitu juga, teknik impregnasi perak membolehkan pengenalpastian spirochetes. Flagella mudah diperhatikan apabila dicemari dengan noda Ryu. Pewarnaan hijau malachite membantu mengenal pasti spora bakteria.