Kandungan
- Mengedipkan Sampel, Penyaduran dan Inkubasi
- Mengira Manual
- Pengiraan Automatik
- Membuat Mengira Lebih Rumit
Salah satu kaedah klasik untuk menentukan kepekatan mikrob dalam sampel ialah mencairkan sampel, membesar mikroba pada plat dan menghitung koloni. Mikro bersalut tumbuh dari unit membentuk koloni yang terdiri daripada satu atau lebih sel ke dalam koloni yang kelihatan yang dapat dilihat dan dihitung. Bakteria adalah mikroba yang paling biasa untuk menilai menggunakan perkiraan plat. Taksiran koloni digunakan untuk mengesan dan mengira mikrob dalam tanah, air dan makanan. Protokol untuk mengira koloni menekankan pendekatan yang tepat dan teratur.
Mengedipkan Sampel, Penyaduran dan Inkubasi
Sekiranya anda hanya mencampurkan sampel mikroba pada plat agar, anda akan melihat unit pembentukan koloni yang banyak sehingga koloni individu akan bergabung bersama, menjadikannya tidak mungkin dikira. Untuk menyelesaikan masalah ini, campurkan sampel ke dalam medium cecair, ambil sedikit campuran itu dan cairkan lagi. Ulangi proses ini enam hingga 10 kali. Sebarkan pencairan terakhir pada pinggan agar dan masukkannya selama empat hingga tujuh hari sebelum anda menghitung koloni.
Mengira Manual
Trik utama dalam menghitung koloni adalah mengira setiap titik koloni sekali. Satu pendekatan adalah untuk menetapkan hidangan Petri pada latar belakang grid dan menghitung koloni di setiap sel grid, bergerak dalam pola metodikal melalui semua sel. Memandangkan koloni yang dihitung di bahagian belakang hidangan Petri juga boleh menjadi pendekatan yang berguna. Pada umumnya, anda perlu mengira sekurang-kurangnya tiga plat; hanya gunakan plat yang mengandungi 30 hingga 300 jajahan untuk membuat kesimpulan yang kuat, mencadangkan Rangkaian Mikrobiologi, firma yang menyediakan perkhidmatan perundingan kepada makmal dan pengeluar. Plat dengan koloni yang terlalu banyak untuk dikira atau dengan sedikit koloni perlu disalut semula daripada pencairan baru.
Pengiraan Automatik
Kesalahan manusia menambah masa yang terlibat dalam mengira koloni secara manual. Untuk meningkatkan ketepatan dan kecekapan, letakkan hidangan Petri dalam peranti mengira jajahan automatik. Kaunter koloni automatik mengambil imej hidangan, memisahkan koloni dari latar belakang dan kemudian menggunakan algoritma untuk menghitung koloni di atas pinggan. Algoritma boleh mengalami kesulitan membezakan koloni apabila dua atau lebih koloni menyentuh di tepi, jadi ini adalah kawasan pembangunan perisian yang sedang berjalan.
Membuat Mengira Lebih Rumit
Ketepatan pengiraan ketumpatan mikroba dari jumlah koloni mempunyai beberapa batasan. Unit pembentuk koloni boleh menjadi satu sel tunggal, rantai sel atau rumpun keseluruhan sel. Anggapan bahawa koloni mewakili satu sel, jadi kepekatan yang dikira dari jumlah koloni boleh menjadi rendah. Mikroba yang berbeza memerlukan keadaan pertumbuhan yang berbeza, dan koloni pada plat hanya mewakili mikrob yang berkembang maju pada media pertumbuhan di bawah keadaan pengeraman. Di samping itu, kiraan koloni tidak mendaftarkan sel mati, satu pertimbangan penting apabila anda memerlukan kepekatan sel dalam sampel asal.