Bagaimana Menghitung KCAT dan VMAX

Posted on
Pengarang: Monica Porter
Tarikh Penciptaan: 20 Mac 2021
Tarikh Kemas Kini: 18 November 2024
Anonim
How to calculate Km and Vmax values - Lineweaver Burk plot in Excel
Video.: How to calculate Km and Vmax values - Lineweaver Burk plot in Excel

Kandungan

Bahkan molekul atau organisma yang terkecil dengan masa reproduksi cepat boleh mengambil masa yang panjang untuk menghasilkan apa yang anda ingin belajar. Untuk bakteria dalam hidangan petri, kelajuan reaksi bergantung kepada berapa banyak reaktan yang terdapat serta kehadiran enzim. Walau apa pun keadaannya, anda boleh menggunakan persamaan untuk menentukan kelajuan tindak balas biokimia ini.

Kinematik enzim

Dalam kimia, kadar reaksi dijelaskan menggunakan nilai k yang mengukur seberapa cepat reaksi berlaku daripada reaktan kepada produk. Untuk tindak balas yang menggunakan pemangkin, sebatian biologi yang mempercepatkan kadar tindak balas, kadar, kkucing, membolehkan anda menentukan kelajuan maksimum tindak balas. The kadar tindak balas maksimum, Vmaks, memberitahu anda berapa banyak molekul ditukar kepada produk reaksi apabila enzim sepenuhnya larut.

Enzim mencapai kelajuan tinggi ini dengan menurunkan tenaga pengaktifan reaksi, jumlah tenaga yang diperlukan untuk tindak balas yang berlaku. Apabila ikatan enzim ke substrat, molekul atau sebatian yang anda sedang memerhati, ia membentuk kompleks enzim-substrat. Mereka tidak langsung mempengaruhi berapa banyak reaktan atau sebatian produk yang anda ada, dan ia juga bergantung kepada faktor lain seperti kepekatan enzim, pH suhu dan kekuatan antara ikatan ionik.

Persamaan KCAT

Kadar tindak balas membolehkan anda menulis persamaan untuk menentukan berapa banyak reaktan yang membawa kepada berapa banyak produk yang anda ada. Untuk tindak balas asas xA + yB → zC (iaitu, menukar x tahi lalat A dengan y tahi lalat B hasil z tahi lalat C), persamaan kadar akan berlaku r = k m x n_for the rate reaction _r, kadar tetap k dan kepekatan molar A dan B ditandakan oleh tanda kurung. M dan n adalah eksponen yang anda tentukan melalui eksperimen yang mengukur seberapa cepat tindak balas berlaku. F

Untuk kes tertentu tindak balas enzim-catalyzed halaju awal v0 adalah v0 = kkucing/ Km halaju reaksi awal v0. Halaju ini memberitahu anda kadar pemangkinan dalam hal ini kkucing formula. Km adalah Michaelis-Menten tetap, yang mana anda boleh mengukur eksperimen atau mengira sebagai kepekatan substrat pada separuh daripada halaju maksimum.

Pemalar mendapat namanya dari Persamaan Michaelis-Menten v0 = vmaks x / (Km + ) untuk kepekatan substrat dan halaju maksimum vmaks memberitahu anda berapa cepat reaksi enzimatik. Apabila anda mengira kkucing, anda juga boleh menulis v0 = kkucing x x / Km sebagai kaedah umum tindak balas untuk kepekatan enzim dan substrat dan , masing-masing.

Kaedah Persamaan KCAT Lain

Persamaan yang berbeza ini membolehkan anda menggunakan yang paling sesuai untuk tujuan apa pun yang anda perlukan sama ada kadar pembiakan bakteria atau kadar pencucuhan antara bahan bakar dan gas. Anda juga boleh menggunakan persamaan ini dalam menggabungkan kedua-dua pemerhatian eksperimen dengan model dan pengiraan teori. Anda boleh mengetahui tentang kepentingan kaedah persamaan Michaelis Menten melalui cara yang berbeza untuk menentukan kadar tindak balas.

The kkucing persamaan menyediakan asas untuk penciptaan bioreaktor. Ini adalah sistem yang membolehkan mikroorganisma berkembang dalam persekitaran yang optimum, yang dapat menghasilkan sebanyak mungkin produk. Bioreaktor juga digunakan untuk membuat makanan yang ditapai di beberapa negara Asia.

Secara amnya sangat sukar atau mustahil untuk menentukan maksud Km tanpa maklumat lanjut. Para saintis menggunakan nisbah tersebut kcat / Km untuk mengukur bagaimana secara khusus dan cekap suatu ikatan enzim dengan substrat. Nisbah ini, dikenali sebagai pemalar kekhususan kSP, membolehkan anda mengubah persamaan Michaelis-Menten sebagai v = kSP/ (1 + kSP/ kkucing) untuk mengukur nilai yang lebih tepat kSP.