Kandungan
Escherichia coli, E. coli, adalah bakteria yang tumbuh di usus bawah mamalia. Bakteria ini mula-mula ditemui pada akhir tahun 1800-an. Sejak itu, ia mempunyai sejarah penggunaan yang panjang dalam penyelidikan saintifik. Ia adalah organisma yang paling banyak digunakan dalam genetik molekul. Sebahagian daripada sebab E. coli yang biasa digunakan dalam penyelidikan saintifik adalah mudah tumbuh di makmal. Faktor-faktor yang menjadikan E. coli mudah tumbuh adalah keperluan pemakanan yang sederhana, kadar pertumbuhan yang cepat dan keperluan penyelenggaraan yang sederhana.
Mendiami gelung inokulasi dengan meletakkannya di api dari pembakar Bunsen. Lulus separuh bahagian bawah gelung melalui api sehingga ia bersinar merah.
Benarkan gelung sejuk. Anda boleh menyentuhnya ke agar steril di atas pinggan untuk memastikan ia sejuk. Jangan letakkan gelung di atas meja atau biarkan ia menghubungi apa-apa selain daripada steril agar atau budaya yang diinginkan sekarang bahawa ia telah disterilkan.
Sapukan gelung ke dalam budaya E. coli dan kemudian keluarkannya.
Buka plat agar dan perlahan-lahan meluncur gelung di seberang permukaan satu bahagian dalam agar. Berhati-hati untuk tidak menggaru melalui agar dengan gelung. Agar menyediakan nutrien E. coli perlu berkembang.
Letakkan gelung di api pembakaran Bunsen sekali lagi untuk mensterilkannya. Setelah rod gelung menyejukkan, sentuh ke bahagian steril plat untuk memastikan ia sejuk, kemudian luncurkan gelung melalui coretan pertama anda untuk membuat coretan kedua. Strip kedua ini adalah versi dicairkan daripada coretan pertama. Ulangi proses pensterilan dan peluncuran ini sehingga beberapa bahagian plat agar telah meluncur. Sebab anda melakukan ini adalah supaya anda boleh memilih dari koloni tunggal, clonal. Ini akan membantu memastikan anda mempunyai sekurang-kurangnya satu bahagian yang mempunyai koloni individu - tidak terlalu tertumpu (yang akan mempunyai pertumbuhan terlalu banyak, dan tidak membenarkan anda memilih dari satu koloni) dan tidak terlalu cair (yang tidak akan memberi koloni) .
Meringalkan gelung dalam api kali terakhir sebelum meletakkannya di kawasan kerja.
Letakkan bahagian atas ke plat pancang. Hidupkan plat terbalik dan letakkan ke dalam inkubator yang ditetapkan kepada 37 darjah Celcius (98.6 darjah Fahrenheit). Suhu inkubasi yang ideal ini menyerupai suhu badan manusia di mana E. coli berada. Dalam tempoh 24 hingga 48 jam, koloni kelihatan bakteria E. coli akan muncul di dalam plat agar.